RMC冷凍超薄切片機在生物電鏡樣品制備應(yīng)用

在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域，透射電子顯微鏡（TEM）是觀察細胞超微結(jié)構(gòu)的重要工具，而高質(zhì)量的超薄切片是TEM觀察的前提。RMC LN-Ultra超薄切片機在此流程中扮演著關(guān)鍵角色，其常規(guī)定溫和低溫切片能力滿足了多種生物樣品的制備需求。

常規(guī)制備流程中，生物組織（如小鼠肝臟、腦組織或培養(yǎng)細胞團塊）需先經(jīng)過醛類固定、鋨酸后固定、脫水、以及樹脂滲透包埋等步驟，形成堅硬的樣品塊。將此樣品塊安裝在LN-Ultra的樣品頭上，在室溫下用玻璃刀或鉆石刀進行切片。設(shè)備能夠切出厚度為50-100納米左右的切片，這些切片被撈取到載網(wǎng)（如銅網(wǎng)）上，再進行醋酸鈾酰、檸檬酸鉛等重金屬染色，增加細胞結(jié)構(gòu)的電子散射反差，最后置于TEM下觀察。

當處理對溫度特別敏感或富含脂質(zhì)難以用樹脂包埋的樣品時，LN-Ultra的低溫功能顯得有用。例如，在冷凍置換技術(shù)中，樣品經(jīng)過快速冷凍后，在低溫下用有機溶劑置換冰，同時引入低溫樹脂并紫外光聚合。由此得到的樣品塊可以在LN-Ultra的低溫室中進行切片，避免了常溫處理可能導(dǎo)致的脂質(zhì)提取或抗原破壞，更好地保存了生物大分子的活性和原始結(jié)構(gòu)。這種低溫切片技術(shù)也與冷凍電子顯微鏡（Cryo-EM）的觀察需求相銜接。

操作注意事項包括：確保樣品塊頂端修整平整光滑；根據(jù)樹脂硬度和樣品特性選擇合適的切片厚度與速度；保持刀槽液面清潔，以便切片能順利展平；撈取切片時動作輕柔，避免破損。低溫切片時還需額外注意防冰和溫度穩(wěn)定。

參數(shù)表（生物應(yīng)用相關(guān)）：
型號：LN-Ultra
典型生物切片厚度：50 nm - 200 nm（用于TEM）
樣品塊面修整：可使用設(shè)備配合玻璃刀進行
適用樣品包埋介質(zhì)：環(huán)氧樹脂、低溫樹脂等
低溫切片適用：可用于冷凍置換樣品、部分未包埋冷凍樣品

RMC冷凍超薄切片機在生物電鏡樣品制備應(yīng)用